Nachweis von Seneszenz-assoziierten Heterochromatinfoci in humanen Lungenfibroblasten – methodische Aspekte
KC Müller, L Welker, K Paasch, B Feindt, KD Diemel, D Branscheid, H Magnussen, RA Jörres, O Holz · Pneumologie · 2009 · Heft 02
Bibliografische Angaben
Zusammenfassung
Einleitung: In Kernen von seneszenten Zellen bilden sich Heterochromatin-Domänen aus, die durch Anfärbung mit DAPI und Fluoreszenzmikroskopie nachweisbar sind („SAHF“, Senescence-Associated Heterochromatin Foci [Narita, Cell 2003]). Im Vergleich zur Detektion seneszenter Zellen durch die Anfärbung von ß-Galactosidase (Dimri, PNAS 1995), ist der Nachweis von SAHF weniger zeitaufwendig und die SAHF-Bildung zudem mechanistisch direkter an der zellulären Seneszenz beteiligt (Narita, BJC 2007). Methode: Humane Lungenfibroblasten wurden auf Deckgläschen eingesät (40.000/well) und SAHF während der Alterung in Kultur, s…