Messung der Exozytose von Insulin-Sekretgranula mittels zweier unterschiedlicher Varianten der TIRF-Mikroskopie
K Hatlapatka, A Tengholm, S Barg, I Rustenbeck · Diabetologie und Stoffwechsel · 2009 · Heft 05
Bibliografische Angaben
Zusammenfassung
Einführung: In den letzten Jahren werden vermehrt mikrofluorimetrische Verfahren (Imaging) angewendet, um ein umfassenderes Bild von der Regulation der B-Zell Exozytose zu gewinnen. Besonders interessant ist die TIRF oder evanescent wave Mikroskopie, da hier nur eine plasmamembrannahe Schicht von 50 bis 200nm zu Darstellung kommt. Die Aussagekraft hängt jedoch stark von methodischen Variablen ab, die bisher nur unvollständig charakterisiert wurden. Methoden: Insulinsezernierende MIN6 Zellen wurden mit einem Insulin-EGFP Fusionsprotein oder einem IAPP-EGFP Fusionsprotein transient transfiziert und die Reaktion de…