Suppression des Transkriptionsfaktors HIF-1a durch RNA interference: Effekte auf Zielgene und Zellproliferation in A549 Zellen

In dieser Studie wurde ein siRNA Motiv für den Hypoxie-induzierbaren-Faktor-1a (HIF-1a) selektiert und auf die Lungen-Adenokarzinoma Zelllinie A549 angewendet. Die Auswirkungen von RNAi gegen HIF-1a wurden unter normoxischen und hypoxischen Bedingungen auf verschiedenen Ebenen untersucht. Es konnte nach Transfektion der A549 Zellen mit HIF-1a siRNA eine Reduktion der HIF-1a mRNA mittels realtime RT-PCR gezeigt werden. Diese wurde auf Proteinebene von einer Abnahme von HIF-1a in Hypoxie begleitet (nachgewiesen durch Western-Blot und Immunzytochemie). Auf HIF-1 Zielgen Ebene fanden wir in Hypoxie einen Abfall von…